Este curso avanzado ofrece una formación integral en HPLC, capacitándote para dominar los parámetros de separación, la preparación de muestras y la selección de hardware, con el fin de desarrollar, optimizar y transferir métodos analíticos de alta precisión con total autonomía técnica.
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Objetivos
OBJETIVOS: - Revisar los principales parámetros cromatográficos y su influencia en la separación por HPLC. - Presentar los diferentes mecanismos de separación y sus aplicaciones. - Comentar diferentes procedimientos de preparación de muestra y su importancia en el análisis por HPLC. - Revisar detalladamente los diferentes sistemas de detección y de columnas existentes, sus aplicaciones, sus ventajas y sus inconvenientes. - Aprender a desarrollar y optimizar métodos para HPLC, estudiando la influencia de la variación de las condiciones analíticas en los cromatogramas. - Estudiar la adaptación de métodos oficiales o bibliográficos a las características de la instrumentación disponible en cada laboratorio, así como la transferencia de métodos entre instrumentos distintos.
Temario completo de este curso
1. Introducción
a. Introducción al desarrollo de métodos analíticos por HPLC
b. Tipos de HPLC
c. El desarrollo de métodos analíticos HPLC
2. Objetivos de la separación cromatográfica
a. Influencia de la retención , la eficiencia y la selectividad en la resolución
cromatográfica
b. Criterios a considerar en el desarrollo de un método HPLC
c. Cómo saber que hemos alcanzado los objetivos.
3. La muestra en HPLC
a. Objetivos de la preparación de muestra para HPLC
b. Técnicas de preparación de muestra.
4. Sistemas de detección en HPLC
a. Parámetros ajustables de la detección UV-VIS
b. Otros detectores (Fluorescencia, Conductividad, Electroquímico, RI,
ELSD, CAD, MS)
5. Columnas para HPLC
a. Como elegir una columna
b. Fases estacionarias de fase reversa
c. Importancia de las dimensiones de la columna
6. Desarrollo de métodos HPLC de fase reversa
a. Características importantes de la fase móvil en HPLC de fase reversa
b. Elección de los parámetros operativos para los primeros ensayos
c. Valoración de los resultados preliminares
7. Optimización de métodos HPLC de fase reversa
a. Optimizar la separación (eficiencia, resolución y tiempo de análisis)
b. Optimizar la sensibilidad
8. Adaptación de métodos oficiales
a. Columnas equivalentes
b. Directrices de la USP y la Farmacopea Europea
c. Ajustes admitidos por las farmacopeas
d. Ajustes no permitidos por las farmacopeas
9. Transferencias de métodos HPLC de fase reversa
a. Adaptación de un método HPLC a columnas / equipos de altas
prestaciones (UHPLC)